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厌氧培养的具体操作程(zhn)知道多?

发布旉Q?022-03-16 来源Q?a href='http://www.mkilemt.cn/news/27.html'>http://www.mkilemt.cn/news/27.html

亨盖Ҏ(gu)技术可以用在一些有益厌氧菌上,比如在双歧杆菌的分离和活菌培养计数。另外还可以用于腐|菌类和病原菌的分d鉴定上?/span>


亨盖特Hungate厌氧滚管技术是国外微生物学家亨盖特?950q明提出ƈq用于瘤胃厌氧微生物研究?b>厌氧培养技术。该技术经历了(jin)几十q的不断完善Q亨盖特厌氧技术日益完善,q渐发展成ؓ(f)一套完整的厌氧微生物研I技术。数q的实践l验证明Q它是一U特别合理的研究严格Q专业厌氧菌的技术?/span>

1.铜柱pȝ除氧?/span>

铜柱是一U里面有铜丝或铜屑的玻璃试。管道尺ؓ(f)40-400mmQ两D는产加工成漏斗Q表面周Ҏ(gu)加热带,q与变压器衔接,以操U는(sh)电(sh)压,E_铜柱的温度。铜׃面衔接Y,下端衔接气瓶Q下端衔接出口。由于N2、CO2、H2{从气瓶中所产生的气体通常带有O2Q当q些气体通过U?60℃的铜柱Ӟ铜和气体中的微量CO2化合物所产生CuoQ铜׃明亮的黄色变?sh)黑艌Ӏ当氧化铜柱q入H2ӞH2与Cuo中的氧结合Ş成H2OQCuo恢复为铜Q铜柱呈明亮的黄艌Ӏ这U铜柱可以重复用,q不断发挥除氧的作用。当?dng)H2源也可以由氢发生器所产生?/span>

5.2培养基培d和稀释液的制备?/span>

制作预还原培d和稀释液Ӟ先将准备好的培养基和E释液煮沸驱氧Q然后趁热将半定量加样器装入螺口厌氧试管。一般琼脂培d?.5-5mlQ稀释液?mlQ插入N2气长针排除O2。这时可以清楚的看到Q培d中添加的氧化q原指示剂叶片天青从蓝到U变成无Ԍ说明试管已经变得无氧Q然后用Z口覆盖丁烯胶塞和Z盖灭菌备用?/span>

5.3制备不一L(fng)释度的双歧杆菌试品?/span>

在无菌情况下Q准的?gZ或用无菌注射器获?ml混合均匀的液体试品,然后d带有预还原生理盐水的厌氧试管Q用冲击器均匀冲击Q做?0-1E释液。用无菌注射器将1ml10-1E释液获取到另一根带?ml生理盐水的试中Q做?0-2E释液。按此操作步骤,?0倍系列稀释至10-7Q做成不一h度的试品E释液。滚培养计数通常选择10-5?0-6?0-7?/span>

5.4厌氧滚管培养法?/span>
把有融化的无菌无氧琼脂培d试管攑֜五十摄氏度左右的水中Q用无菌注射器吸取三U(10-5?0-6?0-7Q稀释度的稀释液融化D培养口厌氧试里面,再把它^方在有冰块的盘子里,由此带菌的融化培d׃(x)在试内壁Ş成一层薄层。需要把每个E释度q行重复三次操作Q在攑ֈ37℃的培养里面。经q?4时?8时后,可以在螺口厌氧试管的琼脂层内看到菌落?/span>

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